銳賽生物

心血管與代謝鄰域疾病研究平臺

cardiovascular

代謝疾病和心血管疾病研究團隊擁有經驗豐富的管理人員和研究團隊，截至目前，銳賽生物代謝疾病和心血管疾病研究團隊已進行超過500個化合物的體外篩選評價，體內藥效評估超過100個項目。團隊以客戶需求為導向，與多個國內外制藥公司，大中小型生物技術企業及大學科研部門廣泛合作，為客戶提供優質而全面的藥效評價及機制研究服務。

服務范圍

體外研發服務

• 體外代謝靶標藥物篩選

• 體外MOA（Mode Of Action）研究

體內藥理藥效評價服務

• 糖尿病模型

• 心血管疾病模型

• 肥胖模型

• 肝臟疾病模型

• 腎病模型

體外代謝靶標藥物篩選    

體外MOA（Mode Of Action）研究

• GLP-1受體/報告基因穩轉株細胞：GLP-1 類似物篩選

• 腎系膜細胞及上皮細胞：相關腎病、糖尿病藥物篩選

• 胰島：胰島素的合成和分泌

• 脂肪細胞：葡萄糖的攝取

• 肝臟細胞：糖原合成，糖異生，脂質代謝，肝損傷、肝纖維化以及溶纖維化的標志物分析

• 肌肉細胞：葡萄糖的攝取，脂肪酸的氧化

大鼠原代胰島細胞胰島素分泌實驗

3T3-L1細胞葡萄糖攝取實驗

體內藥理藥效評價服務---糖尿病/肥胖

糖尿病是一種全球流行的慢性進展且不可治愈的疾病，90%的糖尿病患者為II型糖尿病。當前的降糖治療有顯著的副作用，因此急需風險更低的新治療藥物并控制糖尿病并發癥。同時，急需能夠加強新藥用于患者之前的臨床前評價的合適的技術和模型。

糖尿病/肥胖模型

DIO models

DIO+STZ induced T2DM models

BKS-DB自發性糖尿病小鼠

ZDF自發性糖尿病大鼠

B6-OB自發性肥胖/糖尿病小鼠

檢測項目

攝食量，血糖，GTT，ITT，心超，體脂比，骨密度，代謝籠，血生化，胰島素檢測，糖化血紅蛋白，代謝相關的細胞因子，炎癥因子，組織病理學

糖尿病/肥胖模型鼠特征對比

體內藥理藥效評價服務---DIO小鼠

銳賽生物心血管與代謝疾病部門利用C57BL/6JNju小鼠從5周開始喂養自制高脂飼料（XZ-HF-60)或者60%高脂飼料（D12492）進行造模，此品系可以用研究糖尿病、炎癥、代謝類疾病等。目前我們可以提供6-29周齡的DIO小鼠。

DIO 小鼠模型特點

• 可以用7-30周的DIO雄鼠研究飲食誘導性肥胖

• 可用于體內藥理學研究

• 可用于表型和母性研究

  
  

體重/體脂監測

GTT/ITT分析

體內藥理藥效評價服務---DIO+STZ誘導的T2DM模型

C57BL/6 模型造模方法：

6周齡，60% HF 飼料飼養4周，禁食過夜后腹腔注射STZ（25mg/kg）3次，每次間隔1天

SD Rat 模型造模方法：

6周齡，60% HF 飼料飼養2個月，禁食過夜后腹腔注射STZ（45mg/kg）1次

體內藥理藥效評價服務--- 自發糖尿病小鼠/大鼠

BKS-DB

模型描述：

BKS-DB模型以Dock7^m小鼠為背景，利用CRISPR/Cas9技術和囊胚注射技術構建Dock7^m-Lepr雙基因突變小鼠。該品系純合子血糖監測發現，血糖水平與野生對照相比呈顯著性差異，可用于II型糖尿病研究。

模型數據：

B6-OB

模型描述：

B6-OB模型是利用針對mouse Leptin基因的gRNA, 采用CRISPR/Cas9技術和囊胚注射技術，得到能夠導致Leptin基因移碼突變的小鼠模型。純合子小鼠大約4周開始出現肥胖表型，可達野生型小鼠體重的3倍，可用于肥胖癥研究。純合子小鼠血糖在12周以前略高于對照組，之后恢復正常，是早期高血糖模型。

模型數據：

體內藥理藥效評價服務---心血管疾病

心血管疾病模型

• 自發高血壓小鼠模型

• 自發性動脈粥樣硬化小鼠模型

• 冠狀動脈結扎致心肌缺血大鼠模型

檢測項目

血壓，血清TC，TG，HDL-c，LDL-c，血管組織病變，Cholesterol Efflux Assay，炎癥因子，心率，心超，心臟組織病變

B6.129P2-Nos3^tm1Unc/J自發高血壓小鼠模型

模型描述：

B6.129P2-Nos3^tm1Unc/J模型以C57BL/6J小鼠為背景，利用傳統ES打靶技術構建Nos 3基因突變小鼠。該品系純合子血壓監測發現，血壓水平較野生對照高約20 mmHg，同時也表現出心率下降。

模型數據：

B6/JNju-Apoe^em1Cd82/Nju動脈粥樣硬化小鼠模型

模型描述：

該模型是以C57BL/6J小鼠為背景的ApoE基因敲除鼠，采用CRISPR/Cas9方法制作，Exon 3上切割產生的斷口經NHEJ修復后，引入的in-del突變導致基因失活。ApoE敲除小鼠喂食40%高脂飼料后，能加快動脈粥樣硬化的進程。

模型數據：

小鼠主動脈弓油紅O染色實驗結果

B6/JNju-Ldlr^em1Cd82/Nju動脈粥樣硬化小鼠模型

模型描述：

該模型是利用針對mouse LdlR基因的gRNA, 采用CRISPR/Cas9技術和囊胚注射技術，得到能夠導致LdlR基因移碼突變的小鼠模型。LdlR基因缺陷小鼠可用來研究糖尿病腎病，動脈粥樣硬化高脂血癥和高血糖疾病等。

模型數據：

冠狀動脈結扎致心肌缺血大鼠模型

動物：6周齡SD大鼠（180-220g）

造模方法：大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，記錄Ⅱ導聯心電圖，呼吸機輔助呼吸(呼吸頻率60次／min，潮氣量10～12ml，呼吸比為2：1，以保持動脈血PaCO2、PaO2和pH維持在正常范圍)。在胸左側第3、4肋間處打開胸腔，暴露心臟，用細小彎針在冠狀動脈左前降支下穿一絲線結扎，以縫線下方心肌色澤變淺、蒼白，同時心電圖出現ST段弓背向上明顯抬高，為結扎成功。

指標觀察：造模后24小時，將各組大鼠麻醉取血，分離血清，用自動生化分析儀和化學發光分析機分別測定各組大鼠血中CK-MB、eTNI含量。

結果判定：模型組大鼠血中CK-MB、eTNI含量顯著高于假手術組。

內藥理藥效評價服務---腎病

慢性腎病發病率急劇上升，由于腎病的病因既包括代謝的紊亂也包括免疫系統的下降，另外還受到遺傳等因素的影響。因此腎病藥物與治療措施的研發亟需開發多種不同類型的，貼近實際臨床病理特征的腎病動物模型。銳賽生物針對腎病藥物研發建立了多種腎病模型，為腎病的新藥臨床前研究提供專業服務。

腎病模型

• 腎纖維化模型

• 單側腎切除糖尿病模型

• 嘌呤霉素誘導的腎病模型

• 血管緊張素II滲透泵和單側腎切除誘導的急性腎損傷模型

檢測項目

尿量，尿糖，尿蛋白，腎小球濾過率

炎癥因子：TGF-β1，IL6 等

腎功能指標：CRE, BUN, UA, Kim-1, renin

腎組織病理檢測

腎間質纖維化小鼠模型

模型描述：

利用單側輸尿管梗阻技術，將C57BL/6J小鼠左側輸尿管結扎，結扎后1周內左側腎臟開始出現腎間質纖維化病理特征，并伴隨大量細胞和分子病理生理變化。

模型數據：

體內藥理藥效評價服務---腎病

模型描述：

利用C57BL/6J小鼠行左側腎臟切除術，術后正常飼養，護理恢復。1周后給予60%高脂飼料飼養8周，構建單側腎切除糖尿病小鼠模型。該模型的腎臟病變特征近似糖尿病性腎病，可用于轉化醫學研究或新藥臨床前藥效評估。

模型數據：

嘌呤霉素誘導的腎病模型(PAN)

模型描述：

利用wistar大鼠行靜脈注射嘌呤霉素一次，劑量40mg/kg，構建嘌呤霉素誘導的腎病模型(PAN)。

模型數據：

體內藥理藥效評價服務---肝病

急性和慢性的肝臟類疾病研究威脅人類的健康，肝臟疾病是藥物開發的重點方向。銳賽生物肝病研究團隊建立了多種動物及各個種類的肝臟疾病模型，其中包括急性肝損傷模型，肥胖誘發的肝損傷模型，非酒精性脂肪性肝炎（NASH），酒精性脂肪肝（ASH），肝纖維化模型，能夠為客戶提供高效的先導化合物肝臟疾病療效篩選驗證。

肝病模型

• 高脂誘導的慢性脂肪肝模型

• CCl4誘導的急性肝損傷模型

• 酒精誘導的急性肝損傷

• 膽管結扎引起的肝纖維化模型

• DIO+CCl4誘導的小鼠NASH模型

檢測項目

常規：體重，行為，攝食，攝水及排泄

肝臟重量，腹水檢查，門靜脈測壓

生化：血清ALT/AST分析，基因表達及分析，

肝細胞羥脯氨酸檢測

病理：肝臟組織H&E染色，IHC，Oil red和Masson Trchrome染色

高脂誘導的慢性脂肪肝模型

模型描述：

利用C57BL/6J小鼠從4周齡開始喂養自制高脂飼料（XZ-HF-60)或者60%高脂飼料（D12492）進行造模，20周齡后模型鼠平均體重＞45g，出現明顯的脂肪肝病理改變。

模型數據：

體內藥理藥效評價服務---肝病

CCl4誘導的急性肝損傷模型

模型描述：

選用6周齡SD大鼠，用四氯化碳（CCl4）誘導法。大鼠按3ml/kg體重腹腔注射50%的四氯化碳橄欖油溶液，24小時后取血檢測。

模型數據：

單管結扎引起的肝纖維化模型

模型描述：

選用6周齡SD大鼠，按10mg/kg體重腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，腹部皮膚消毒，無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔，分離出膽管，在膽管近端和遠端2處結扎膽管。手術后正常飼養28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學檢查。

模型數據：

肝臟組織H&E染色

DIO+CCl4誘導的小鼠NASH模型

模型描述：

選用C57小鼠，給予60%高脂飼料飼養8周。從高脂飼養第5周開始，每周腹腔注射40% CCl4一次，劑量4ml/kg/次， CCl4 誘導共4周，誘導結束后眼眶采血評估血清生化指標判斷造模成功。

模型數據：