銳賽生物

活性氧（ROS）檢測

Reactive Oxygen Detection

實驗原理

活性氧檢測（Reactive Oxygen Species Assay Kit）是一種基于熒光染料DCFH-DA（2,7-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate）的熒光強度變化，定量檢測細胞內活性氧水平的最常用方法。

DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜。進入細胞內后，可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不會通透細胞膜，因此探針很容易被積聚在細胞內。細胞內的活性氧能夠氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。綠色熒光強度與活性氧的水平成正比。在最大激發波長480 nm，最大發射波長525 nm處，使用熒光顯微鏡，流式細胞儀或激光共聚焦顯微鏡等檢測熒光信號。Rosup為活性氧陽性誘導藥物，根據其熒光信號強度，可分析活性氧的真正水平。

檢測

原位裝載探針法：激光共聚焦顯微鏡直接觀察，或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。

收集細胞后裝載探針：用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測，也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。

實驗結果展示